An Enzyme Linked Immunosorbent Assay (Elisa) for the Identification of Km (3) in Dried Bloodstains

ABSTRACT

Approximately 80% of the Caucasian population is Km(−1). Since Km(3) is always present when Km(1) is absent, its identification acts as an internal control to verify the genetic absence of Km(1). Unfortunately, antisera of Km(3) suitable for use with dried blood stains in the inhibition technique have not been available. Although the suggestion has been made to correlate the total lgG content of a blood stain with the Km(1) result, the technique has not been widely accepted.

A manual ELISA technique using a Km(3) anti-serum raised in rabbits and an F(ab¹)₂ conjugate has successfully demonstrated the Km(3) antigen in stains both positive and negative for Km(1). When blood stains from 53 staff members and 60 stains from case material were tested, Km(3) was identified in almost 95% of the samples. A 0.5 mm fibre contains sufficient antigen for detection. When tested as a dried stain, the Km(3) antigen was stable for at least six weeks in liquid blood stored at 37°C or twelve weeks stored at either 4°C or 22°C. When held as a dried stain, Km(3) was identified at seventeen months.

Tests with a limited number of seminal stains gave non-specific results.

RÉSUMÉ

Approximativement 80% des caucasiens sont Km (−1). Puisque Km (3) est toujours présent lorsque Km (1) est absent, il est possible de s'en servir comme contrôle interne afin de confirmer l'absence de Km (1). Malheureusement des antiserum antiKm (3) pouvant être utilisé à l'aide d'une technique d'inhibition ne sont pas disponibles. Une autre technique disponible afin d'identifier le Km (1) était le calcul des IgG total d'une tache de sang, technique qui reçue un accueil plutôt froid.

En se servant d'une technique “Elisa” de façon manuelle à l'aide d'antiserum produits chez les lapins et d'un conjugué F (ab¹)₂ il fut possible de démontrer la présence de l'antigène Km (3) et par le fait même l'absence de Km (1). Un échantillonnage de 53 taches de sang (personnel du laboratoire) et de 60 taches de sang provenant de cas pratiques furent testés et on a noté la présence de Km (3) dans 95% des cas. Une fibre de.5 mm contient suffisamment d'antigène pour permettre les analyses.

Viabilité: En effectuant une tache à l'aide d'un sang liquide:

-	conservé à 37°C; 6 semaines.
-	conservé à 4°C ou 22°C; 12 semaines.

Si le sang est conservé dès le début à l'état de tache, l'antigène Km (3) fut identifié jusqu'à 17 mois. Des tests effectués sur des taches de sperme ne nous ont pas donné de résultats satisfaisants.