Haptoglobins Typing from Bloodstains: An Eclectic Approach

ABSTRACT

Various procedures such as sodium dodecyl sulphate gel electrophoresis requiring monospecific human Hp antiserum, an acid extraction technique and a chloroform extraction method have been in use to avoid the trailing of haemoglobin deterioration products, while determining the haptoglobin types from dried bloodstains. The first two methods, i.e., SDS gel electrophoresis and acid extraction technique, involve lengthy procedures and are uneconomical for routine analysis. The chloroform extraction technique, though simpler and less time consuming, has a drawback; the extractor, i.e. 10% sucrose solution, recommended in this method, is a poor solvent. A modification of the chloroform extraction method using Tris-HCI buffer was employed in the present study, wherein more than 600 dried bloodstains kept under various states of preservation, were tested by non-gradient vertical Polyacrylamide gel electrophoresis. It was possible to determine correctly the haptoglobin phenotypes of dried bloostains nearly two years old by this method.

RÉSUMÉ

Le groupage de taches de sang dans le système haptoglobuline est affecté par la présence de produits de dégradation de l'hémoglobine. Diverses méthodes ont été utilisées afin de contourner ces difficultés: électrophorèse sur gel contenant le détergent au dodécylsulfate de sodium (“SDS”) et révélation à l'aide d'un immunun-sérum monospécifique dirigé contre l'haptoglobuline humaine; extractions à l'acide et au chloroforme. L'électrophorèse sur gel au “SDS” ainsi que l'extraction à l'acide sont des techniques trop onéreuses pour être utilisées de façon routinière. L'extraction au chloroforme, tout en étant plus pratique, présente un inconvénient de taille; la solution servant à extraire, c'està-dire du sucrose à 10%, n'est pas un bon solvent. Nous décrivons ici une modification à la méthode d'extraction au chloroforme où le sucrose est remplacé par une solution tampon Tris-HCI. Plus de 600 taches de sang, conservées de différentes façons, ont été extraites et soumises à une électrophorèse verticale sur gel de polyacrilamide de densité uniforme. Des taches de sang, vieilles de près de deux ans, ont pu être groupées correctement dans le système haptoglobuline grâce à cette méthode.