Abstract
Lyophilized histoplasmin for the agar gel microimmunodiffusion test has been prepared as a candidate World Health Organization Biological Reference Reagent. It was subjected to elevated temperatures for given periods of time and analyzed by the capillary precipitin test and the single radial immunodiffusion test to determine the stability of the H and M antigens. H antigen showed no fall in relative potency when incubated at 48 °C for 20 days. M antigen showed a fall in relative potency after storage at 37 °C and 48 °C, but the extent of the fall was greater in the radial immunodiffusion test than in the capillary precipitin test. Half-lives of the antigens could not be calculated from the Arrhenius equation because the response curves at each temperature followed different kinetics. However, as based on zero time data, M antigen of the lyophilized histoplasmin showed a 20 % drop in relative potency when stored at -20 °C for 2 years. Other analyses suggested that M antigen of liquid histoplasmin stored at 5 °C and of lyophilized histoplasmin stored at -20 °C was degraded at equal rates.
Zusammenfassung
Lyophylisiertes Histoplasmin für den Agar Gel Microimmundiffusions-Test wurde vorbereitet als Kandidat für ein biologisches Referenz-Reagens der WHO. Während bestimmten Zeitperioden wurde das Histoplasmin erhöten Temperaturen ausgesetzt. Anschliessend wurde die Stabilität des H- und M-Antigens mittels eines Capillar-Prezipitin-Test und mittels eines Radial-Immunodiffusions-test analysiert. Das H-Antigen zeigte keinen Wirkungsabfall nach einer Inkubationsdauer von 20 Tagen bei 48 °C. Das M-Antigen zeigte einen Abfall in der relativen Wirkung nach einer Lagerung bei 37 °C und bei 48 °C, der Abfall war grösser gemessen in dem Radial-Immunodiffusions-Test als im Capillar-Prezipitin-Test. Mittels der Arrhenius-Gleichung konnte keine Halbwertszeit des Antigens berechnet werden, weil die Reaktionskurven je nach Temperatur verschiedener Kinetik folgten. Doch verglichen mit der Ausgangskonzentration zeigte das M-Antigen des lyophylisierten Histamins nach 2 Jahren bei -20 °C einen 20% igen Zerfall der relativen Aktivität. Andere Analysen zeigten, dass M-Antigen des flüssigen Histoplasmins aufbewahrt bei 5 °C und das M-Antigen des lyophylisierten Histoplasmins aufbewahrt bei -20 °C die gleichen Zerfallsraten aufwiesen.