Effect of cyclosporin a on normal, mitogen‐stimulated and marek's disease virus‐exposed and transformed chicken lymphoid cells

Summary

Studies have been made with the immunosuppressive drug cyclosporin A (CsA) to examine its value in the establishment of lymphoid tumour cell lines from Marek's disease (MD) lymphomas and from lymphoid cell cultures exposed to MD virus in vitro. CsA was shown to depress the proliferative response of normal spleen cells to phytohaemagglutinin, Coricanavalin A and pokeweed mitogen, and to a lesser extent to lipopolysaccharide. Short‐term proliferative responses of lymphoma cells were either not affected, depressed or stimulated by CsA. The efficiency of establishment of lymphoid cell lines from long‐term cultures of lymphoma cells was not increased by CsA, and the drug had a depressive effect on the proliferation of cell lines in the lympho‐cytoid stage. The majority of lymphoblastoid cell lines studied were stimulated by CsA. Interleukin 2 partially overcame the suppressive effect of CsA on the cell lines, and enhanced the stimulatory effects. Cultures of lymphoid cells exposed to MD virus in vitro were usually depressed by CsA; a few stimulatory combinations were observed, but these were not considered to be of biological significance.

These results indicate that CsA suppresses normal T‐cell responses in the chicken, but that some MD‐associated lymphoid cells are stimulated by the drug, in some instances at least by a direct effect.

Resume

Des études ont été faites avec la cyclosporine A (CsA) à propriété immuno‐suppres‐sive en vue d'étudier ses effets sur l'établissement de lignées cellulaires de tumeurs lymphoides à partir de lymphomes de la Maladie de Marek (MD) et de cultures de cellules lymphoides exposées in vitro au virus MD. La CsA s'est révélée diminuer la réponse proliférative de cellules normales de rate vis‐à‐vis de la phytohémag‐glutinine, de la Concanavaline A, du raisin d'Amérique mitogène et à un moindre degré du lipopolysaccharide. Les réponses prolifératives à court terme des cellules lymphoides étaient soit non affectées, soit déprimées, soit stimulées par la CsA. L'établissement avec succès de lignées de cellules lymphoides à partir de cultures à long terme de cellules de lymphomes n'a pas été modifé par la CsA mais le produit avait un effet dépressif sur la prolifération de lignées cellulaires dans les stades lymphocytoïdes. La majorité des lignées cellulaires lymphoblastoïdes étudiées a été stimulée par la CsA. L'interleukine 2 a partiellement diminué l'effet suppresseur de la CsA sur les lignées cellulaires et augmente les effets stimulants. Les cultures de cellules lymphoïdes exposées au virus MD in vitro ont été habituellement déprimées par la CsA, bien que les quelques combinaisons à effet stimulateur observées aient été biologiquement sans signification.

Ces résultats indiquent que la CsA supprime les réponses normales des cellules T chez le poulet mais quelques cellules lymphoïdes associées à la MD sont stimulées par le produit, dans quelques cas au moins par effet direct.

Zusammenfassung

Mit der immunosuppressiven Substanz Cyclosporin A (CsA wurden Untersuchungen durchgeführt, um ihren Wert für die Errichtung von lymphatischen Tumorzellen aus Marek‐(MV)‐Lymphomen und von Lymphozytenkulturen, die in vitro mit dem Marek‐Virus inokuliert worden waren zu prüfen. Es wurde festgestellt, daβ CsA die proliferative Reaktion normaler Milzzellen auf die Phytohaemagglutinin Concanavalin A und Pokeweed‐mitogen unterdrückt und etwas weniger stark die auf Lipopolysaccharide. Kurzzeitreaktionen von Lymphomzellen wurden durch CsA entweder nicht beeinflußt, unterdrückt oder stimuliert. Das Gelingen Lympho‐zytenzellinien aus Langzeitzellkulturen von Lymphomazellen zu errichten, wurde durch CsA nicht verbessert. Die Substanz hatte auf die Proliferation der Zellinien im lymphocytoiden Stadium eine depressive Wirkung. Die Mehrzahl der untersuchten Lymphoblastoidzellinien wurde durch CsA stimuleirt. Interleukin 2 überwandt teilweise die suppressive Wirkung von CsA auf Zellinien und beschleunigte den Stimulationseffekt. Die Lymphozytenkulturen, die in vitro mit dem Marek‐Virus inokuliert wurden, wurden gewöhnlich von CsA unterdrückt. Einige weniger stimulative Kombinationen wurden beobachtet, was wahrscheinlich keine biologische Bedeutung hat.

Die Ergebnisse besagen, daß CsA normale T‐zellreaktionen des Huhnes unterdrückt, aber daß einige mit MD associierte Lymphozyten durch die Substanz stimuliert werden, in einigen Fällen mindestens durch eine direkte Wirkung.

Resumen

Se llevaron a cabo estudios con la droga inmunosupresora ciclosporina A (CsA) con el objeto de conocer su valor en el establecimiento de líneas celulares linfoides tumorales delinfomas de la enfermedad de Marek (EM) y de cultivos de células linfoides expuestas al virus de EM in vitro. La CsA demostró ser capaz de deprimir la respuesta proliferativa de células de bazo normal a la fitohemoaglutinina, Con‐canavalin A y al mitógenos pokeweed y en un menor grado a los lipopolisacàridos. Las respuestas proliferativas a corto plazo de las células del linfoma no fueron afectadas, deprimidas o estimuladas por la CsA. La eficiencia para establecer las lineas celulares en cultivos a largo plazo de células linfoma no fue aumentada por la CsA y la droga tuvo un efecto depresivo en la proliferación de las lineas celulares en estado linfocitoide.

La mayoría de las l'ineas celulares linfoblastoides estudiadas, fueron estimuladas por la CsA. El Interleukin 2, superó parcialmente el efecto supresor de la CsA en las líneas celulares y aumentó los efectos estimulantes. Los cultivos de células linfoides expuestas al virus de EM in vitro fueron usualmente deprimidos por la CsA; habiéndose observado pocas combinaciones estimulatorias pero éstas no pueden ser consideradas como biológicamente significativas.

Estos resultados indican que la CsA deprime las respuestas normales de las células T en el pollo pero que algunas células linfoides asociadas a la EM son estimuladas por la droga y que en algunos casos al menos, es por un efecto directo.