Survey of antibody against chicken anaemia agent (CAA) by an indirect immunofluorescent antibody technique in breeder flocks in Japan

Summary

Specific immunofluorescent antigens were detected in MDCC‐MSB1 cells, a lymphoblastoid cell line from Marek's disease lymphoma, infected with chicken anaemia agent (CAA) by an indirect immunofluorescent antibody (IFA) technique. The large and small granular antigens were first recognised in a small proportion of the cells at 12 hours postinoculation (PI) with CAA. The antigen‐positive cells increased gradually thereafter, and they were misshaped and stained irregularly, showing the occurrence of cytopathic effect, after 24 hours PI.

Antibody against CAA was examined by an IFA test, in which the MDCC‐MSB1 cells infected with CAA were used as a source of antigen, in breeder flocks in Japan. Thirty‐nine out of 40 commercial breeder flocks (97.5%) were found to possess the antibody. Of the 381 individual serum samples, 357 (93.7%) were positive. Two positive flocks were found among the 19 specific‐pathogen‐free flocks examined, which have been maintained at our and six private research laboratories in Japan.

The IFA test had the same sensitivity as the neutralisation test (NT) for detecting the antibody against CAA and could be performed more quickly and easily.

Resume

Des antigènes spécifiques immunofluorescents ont été décelés par la technique d'immunofluorescence indirecte (IFA), dans les cellules MDCC‐MSBl, provenant d'une lignée de cellules lymphoblastoïdes dérivée d'un lymphome de la maladie de Marek qui ont été infectées par l'agent de l'anémie du poulet (CAA). Des antigènes granulaires de petite et grande tailles ont été d'abord observés dans une faible proportion de cellules 12 heures après l'inoculation (PI) avec le CAA. Le nombre de ces cellules a ensuite augmenté graduellement puis celles‐ci ont été deformées et irrégulièrement colorées montrant ainsi un effet cytopathique 24 heures PI.

Les anticorps contre le CAA ont été examinés par le test IFA dans lequel les cellules MDCC‐MSBl infectées par le CAA ont été utilisées comme source d'antigène dans les troupeaux de reproducteurs au Japon. Trente neuf des 40 troupeaux commerciaux de reproducteurs (97,5%) ont été trouvés porteurs d'anticorps. Parmi les 381 échantillons de sérums individuels, 357 (93,7%) ont été positifs. Deux troupeaux ont été trouvés positifs parmi les 19 troupeaux exempts d'organismes pathogènes spécifiés (EOPS) examinés qui sont élevés dans notre laboratoire ainsi que dans 6 autres laboratoires de recherches privés japonais.

Le test IFA a la même sensibilité que la séroneutralisation pour la détection des anticorps contre le CAA, mais il peut être réalisé plus rapidement et plus facilement que ce dernier.

Zusammenfassung

Spezifische immunofluoreszierende Antigene wurden in MDCC‐MSBl Zellen, einer Lymphoblastenzellinie aus Marek‐Lymphomen, die mit dem Hühneranaemieagens (CAA) infiziert waren, durch eine indirekte Immunofluoreszierende Antikörpertechnik (IFA) nachgewiesen. Die großen und kleinen granulären Antigene wurden erstmals bei einem kleinen Teil der Zellen 12 Studen post inoculation em (PI) mit CAA erkannt. Anschließend nahmen die antigenpositiven Zellen allmählich zu. Sie wurden mißgestaltet und irregulär gefärbt und zeigten 24 Stunden PI das Auftreten eines zytopathogenen Effekts.

Das Vorkommen von Antikörpern gegen CAA wurde in japanischen Zuchtherden mittels eines IFA‐Test überprüft, bei dem die mit CAA infizierten MDCC‐MSB1 Zellen als Antigenquelle dienten. In neununddreißig von vierzig kommerziellen Zuchtherden (97,5%) wurden die Antikörper nachgewiesen. Von 381 untersuchten individuellen Serumproben reagierten 357 (93,7%) positiv. Zwei positive Herden waren auch unter den 19 untersuchten spezifischpathogenfreièn (SPF) Herden, die in unserem und 6 privaten Untersuchungslaboratorien in Japan gehalten werden.

Der IFA Test besitzt für den Nachweis von CAA Antikörpern die gleiche Empfindlichkeit wie der Neutralisationstest (NT) und kann schneller und leichter durchgeführt werden als der NT.

Resumen

Se detectaron antígenos inmunofluorescentes específicos en células MDCC‐MSB1, por medio de una técnica indirecta de anticuerpos inmunofluorescentes (AIF), empleando una linea celular linfoblastoide de un linfoma de la enfermedad de Marek, infectada con el agente de la anemia en pollos (AAP).

Los antígenos granulares grandes y pequeños fueron reconocidos primeramente en una pequeña proporción de la células a las 12 horas postinoculación (PI) con el AAP. Las células antígeno‐positivas fueron aumentando gradualmente, mostrándose deformes y teñidas irregularmente y encontrándose la presencia del efecto citopático 24 horas PI.

Los anticuerpos contra el AAP fueron examinados por medio de la prueba de AIF, en la cual las células MDCC‐MSB1 infectadas con el AAP fueron usadas como una fuente de antígeno en parvadas de reproductoras en el Japón. Treinta y nueve de 40 parvadas de reproductoras comerciales (97,5%) tuvieron anticuerpos. De las 381 muestras individuales de suero, 357 (93,7%) fueron positivas.

Se encontraron dos parvadas positivas entre las 19 parvadas libres de patógenos específicos (SPF) las cuales estaban siendo monitoreadas por nuestro laboratorio y otros 6 laboratorios privados de investigación en Japón.

Las pruebas de AIF mostraron tener la misma sensibilidad que la prueba de neutralización (PN) para detectar anticuerpos contra el AAP, pero que se puede llevar a cabo mas rápida y fácilmente que la PN.