Development Of An Inactivated Vaccine Against Infectious Laryngotracheitis (ILT) – serological and protection studies

Summary

The strain of infectious laryngotracheitis (ILT virus utilised for these vaccine‐development studies was isolated from an outbreak of the disease in Hungary. Inactivating agents tested included beta‐propio‐lactone, methyleneimine, ethyleneimine EI and formalin. ILT virus preparations inactivated with EI appeared to be the most antigenic when inoculated into chickens in the absence of adjuvant.

For formulation of a trial oil‐emulsion ILT vaccine for experimentation, ILT virus inactivated with 1200 μg/ml of EI was mixed with an equal volume of 50% incomplete Freund's adjuvant and then homogenised. Experimental vaccination of chickens with inactivated ILT vaccine elicited satisfactory serological response and protection to challenge both under laboratory and field conditions. Although only minor increases in antibody titres could be achieved by repeated vaccination with inactivated ILT vaccine at 2 to 5 weeks after primary vaccination at 10‐weeks‐old with attenuated or inactivated ILT vaccines, the protection conferred by vaccination with a single dose of the trial inactivated ILT vaccine appeared to be effective for at least 12 months. Hence, there would appear to be potential for inactivated‐ILT vaccines in control of ILT, especially on sites that are regularly affected by this infection.

Resume

La souche de virus de la laryngotrachéite infectieuse (ILT) utilisée pour le développement d'un vaccin a été isolée d'un foyer de maladie en Hongrie. Les agents d'inactivation ont été la béta‐propiolactone, la méthyleneimine, l'éthyléneimine (El) et le formol. Les préparations de virus ILT inactivées avec l'EI sont apparues être les plus antigéniques par inoculation chez des poulets en l'absence d'adjuvant.

Pour la réalisation d'un essai de vaccination à l'aide d'une préparation de vaccin ILT émulsionnée dans l'huile, le virus a été inactivé avec 1200 μg/ml d'EI mélangé à un volume égal d'adjuvant incomplet de Freund à 50%, puis homogénéisé. La vaccination expérimentale des poulets avec le vaccin ILT inactivé a permis d'obtenir une réponse sérologique satisfaisante ainsi qu'une protection efficace lors d'épreuves réalisées à la fois dans les conditions de laboratoire et de terrain. Bien qu'une augmentation faible du taux des anticorps ait été obtenue par des administrations répétées du vaccin inactivé ILT, 2 à 5 semaines après une primo‐vaccination à 10 semaines avec un vaccin atténué ou inactivé, la protection conférée par la vaccination avec une seule dose du vaccin inactivé expérimental s'est révélée suffisamment efficace pendant une période d'au moins 12 mois. C'est pour cette raison qu'il peut être envisagé l'utilisation d'un vaccin ILT inactivé pour contrôler la maladie dans les régions o[ugrave] elle sévit à l'état endémique.

Zusammenfassung

Der für die Entwicklung dieser Impfstoffe verwandete Virusstamm der Infektiösen Laryngotracheitis (ILT) wurde bei einem Seuchenausbruch in der Umgebung von Bëkëscsaba (Ungarn) isoliert. Folgende Inaktivierungsmittel wurden erprobt: Beta‐propiolakton (BPL), Methylenimin (MEI), Ethylenimin (EI) und Formalin. Die EI inaktivierten ILT‐Virus‐praeparationen scheinen nach Inokulation in Hühner, bei Fehlen eines Adjuvants, die beste Antigen wirkung zu entwickeln.

Im Rahmen der Experimente wurde für die versuchsweise Herstellung eines Öle‐mulsion‐ILT‐Impfstoffes das mit 1200/μg/ml EI inaktivierte ILT‐Virus mit der gleichen Menge von 50% inkomplettem Freund's Adjuvant (IFA) gemischt und homogenisiert. Die experimentelle Impfung von Hühnern mit dem inaktivierten Impfstoff veranlagte sowohl unter Laboratoriums‐ als auch unter Feldbedingungen eine ausreichende serologische Reaktion und einen zufriedenstellenden Schutz gegen eine Testinfektion. Obwohl nach einer Wiederholungsimpfung mit inaktiviertem ILT Impfstoff 2–5 Wochen nach der Erstimpfung mit attenuierten oder inaktivierten Vakzinen von 10 Wochen alten Küken nur ein geringer Titeranstieg der Antikörper erreicht wurde, schien der durch Impfung mit einer einzigen Dosis des inaktivierten Versuchsimpfstoffes erreichte Schutz mindestens 12 Monate vorzuhalten. Daher scheinen inaktivierte ILT Impfstoffe für die Bekämpfung der ILT, besonders an Orten wo sie regelmäßig aufzutreten pflegt, wichtig zu sein.

Resumen

Le cepa del virus de laringotraqueitis infecciosa (LTI) utilizada para la elaboración de esta vacuna fue aislada de un brote de la enfermedad en Hungría. Los agentes inactivantes probados incluyen a la beta‐propiolactona, metileneimina, etilenei‐mina (EI) y la formalina.

Las preparaciones del virus de la LTI inactivadas con EI resultaron ser aparentemente las más antigénicas cuando se inocularon en pollos en ausencia de un adyuvante.

Con el objeto de hacer una prueba con una vacuna contra LTI en emulsión oleosa, el virus de LTI fue inactivado con 1200 μg/ml de EI, la cuel fue mezclada con un volumen igual de adyuvante de Freund incompleto al 50% y a continuación fue homogenizado. La vacunación experimental de los pollos con la vacuna inactivada de LTI arrojó respuestas serológicas satisfactorias así como una buena protección al desafio tanto en condiciones de laboratorio como de campo. Aunque solamente se alcanzaron aumentos menores en los títulos de anticuerpos después de la vacunación con la vacuna inactivada contra la LTI entre las 2 y 5 semanas después de la vacunación primaria a las 10 semanas de edad con una vacuna a virus vivo atenuado o una vacuna inactivada de LTI, la protección conferida por la vacunación con una dosis sencilla de la vacuna inactivada, esta resultó ser efectiva durante un m'mimo de 12 meses, por lo tanto se abre un campo potencial para las vacunas inactivadas para EI control de la LTI especialmente en lugares afectados regularmente por esta infección.