The use of monoclonal antibody probes for the detection of infectious bursal disease virus antigens

Summary

Two monoclonal antibodies (MAb), 2E6 and 2G10, were used against infectious bursal disease virus (IBVD) P3009 in an immuno‐dot assay to detect IBDV antigens from cell culture, and from bursa and spleen tissue samples of chickens. The limit of viral antigens detected by using both MAb probes was 48 ng. The probes were used to detect five serotype 1 IBDV isolates and one serotype 2 IBDV strain. The result indicated that these probes had broad specificity. The probes, however, did not cross‐react with viral antigens prepared from seven unrelated avian viruses.

The probes detected IBDV antigens in bursa and spleen tissues collected from chicks as early as 2 days after inoculation. The IBDV antigens in bursa tissue samples from six poultry farms were detected by both probes. However, tissue samples from two of six farms did not react with probe 2E6. The data suggest that it is possible to use two MAb probes for diagnosis of IBDV infection in poultry farms.

Resume

Utilisation de sondes anticorps monoclonaux pour la détection des antigènes viraux de la bursite infectieuse

Deux anticorps monoclonaux, 2E6 et 2G10, ont été utilisés vis‐à‐vis du virus de la bursite infectieuse (IBDV) P3009 dans un test d'immuno‐dot pour détecter les antigènes IBDV à partir de cultures cellulaires et d'échantillons de bourse et de rate de poulets. La limite de détection des antigènes viraux en utilisant les deux sondes anticorps monoclonaux a été de 48 ng. Les sondes ont servi à déceler cinq souches d'IBDV de sérotype 1 et une de sérotype 2. Les résultats montrent que ces sondes ont une spécificité très large. Les sondes cependant ne présentent pas de réaction croisée avec les antigènes viraux préparés à partir de sept virus aviaires non apparentés. Les sondes ont détecté les antigènes IBDV dans les tissus de bourse et de rate collectés à partir de poulets, dès le deuxième jour après inoculation. Les antigènes IBDV, dans les échantillons de tissus de bourse provenant de six fermes d'élevage de volailles, ont été mis en évidence par les deux sondes. Cependant, les prélèvements de tissus de deux des six fermes n'ont pas réagi avec la sonde 2E6. Ces résultats suggèrent qu'il est possible d'utiliser ces deux sondes anticorps monoclonaux pour le diagnostic de l'infection par l'IBDV dans les fermes d'élevages de volailles.

Zusammenfassung

Die Verwendung von monoklonalen Antikörper‐Sonden für den Nachweis viraler Antigene der infektiösen Bursitis

Zwei monoklonale Antikörper (MAk), 2E6 und 2G10, gegen den Stamm P3009 des Virus der infektiösen Bursitis (IBDV) wurden in einem Immunodot‐Test verwendet, um IBDV‐Antigene aus Zellkulturen und aus Bursa‐ und Milz‐Gewebeproben von Küken nachzuweisen. Die Nachweisbarkeitsgrenze von Virusantigenen war bei Werwendung beider MÄk‐Sonden 48 ng. Die Sonden wurden benutzt, um fünf Isolate vom IBDV‐Serotyp 1 und einen Stamm vom Serotyp 2 nachzuweisen. Die Ergebnisse ließen erkenne, daß diese Sonden eine breite Spezifität hatten. Die Sonden zeigten jedoch keine Kreuzreaktionen mit Antigenen von sieben nicht verwandten aviären Virusarten.

IBDV‐Antigene in Bursa‐ und Milzgeweben von Küken konnten mit Hilfe der Sonden schon 2 Tage nach der Inokulation nachgewiesen werden. Die IBDV‐Antigen in Bursa‐Gewebeproben aus sechs Geflügelfarmen wurden durch beide Sonden nachgewiesen. Gewebeproben aus zwei von sechs Farmen reagierten jedoch nicht mit der Sonde 2E6. Die Ergebnisse lassen darauf schließen, daß es möglich ist, diese beiden MAk‐Sonden für die Diagnostik von IBDV‐Infektionen in Geflügelfarmen zu verwenden.

Resumen

Empleo de anticuerpos monoclonales en la detección de antígenos de la bursitis infecciosa

Se utilizaron dos anticuerpos monoclonales (AMo), 2E6 y 2G10, frente al virus P3009 de la bursitis infecciosa (IBDV) en la técnica de immuno‐dot para detectar antígenos virales en un cultivo celular y de muestras de bursa y bazo procedentes de pollos. El límite de detección de antígenos virales con estos anticuerpos fue de 48 ng. Estos anticuerpos fueron empleados para detectar antígeno de 4 aislamientos del serotipo 1 de IBDV y uno del serotipo 2 de IBDV. Los resultados obtenidos indican que estos anticuerpos tienen una especificdad amplia. Estos Amo no reaccionaron de forma cruzada con antígenos virales preparados a partir de 7 virus aviares no relacionados.

Los anticuerpos monoclonales detectaron también antígenos de IBDV en muestras de bursa y bazo procedentes de pollos infectados experimentalmente, a partir del segundo día postinfección. Empleandon ambos anticuerpos se detectaron antígenos de IBDV en muestras de bursa procedentes de pollos de seis granjas. No obstante, muestras procedentes de dos de las seis granjas no reaccionaron con el AMo 2E6. Los datos obtenidos sugieren que es posible el empleo de AMo en el diagnóstico de la infección por IBDV en granjas de aves.