Protection against reticuloendotheliosis virus—strain T tumours is associated with JMV‐1 culture supernatant‐enhanced natural killer cell activity

Summary

One‐day‐old chicks were inoculated intraperitoneally with cell‐free JMV‐1 culture supernatant and were subsequently challenged with a lethal dose of RECC‐CU60 tumour cells at either 7 or 12 days of age. A significant reduction in mortality was evidenced in chicks that had been inoculated with JMV‐1 culture supernatant prior to RECC‐CU60 tumour cell challenge at 12 days of age, compared with all other treatment groups. Reducing the serum content of JMV‐1 culture medium or changing the base medium in which the JMV‐1 cells were grown did not affect the reduction in mortality, demonstrating that the protective effects against RECC‐CU60 tumour cell challenge were a result of factors secreted into the culture medium by JMV‐1 cells. Development of natural killer (NK) cell activity correlated with findings in the RECC‐CU60 tumour cell challenge studies. Inoculation of 1‐day‐old chicks with JMV‐1 culture supernatant resulted in a significant increase in NK cell activity in spleens taken from JMV‐1 inoculated chicks 12 days later, when compared with spleens taken from chicks in all other treatment groups. Inoculation of chicks with RECC‐CU60 tumour cells caused a suppression of their NK cell activity. Treatment of chicks with JMV‐1 supernatant at day of age, prior to RECC‐CU60 tumour cell challenge restored and significantly enhanced their NK cell activity. These results suggest that the JMV‐1 cell line secretes lymphokines that protect against RECC‐CU60 tumour cell challenge by directly or indirectly stimulating NK cell activity.

Resume

Des poussins d'un jour ont été inoculés par voie intra péritonéale avec le surnageant de culture sans cellule de JMV‐1 et on été ensuite éprouvés avec une dose létale de cellules tumorales RECC‐CU60 à 7 ou 12 jours d'âge. Une réduction significative de la mortalité a été mise en évidence, comparée aux témoins, chez les poulets qui avaient inoculés à deux jours d'âge avec un surnageant de culture de JMV‐1 avant l'épreuve réalisée avec des cellules tumorales RECC‐CU60. En réduisant le contenu de sérum du milieu de culture de JMV‐1 ou en changeant le milieu de base dans lequel ont été cultivées les cellules JMV‐1, il n'a été observé aucun effet sur la réduction de la mortalité, démontrant ainsi que les effets protecteurs lors de l'épreuve avec les cellules tumorales RECC‐CU60 résultaient des facteurs sécrétés dans le milieu de culture par les cellules JMV‐1.

Le développement de l'activité des cellules naturellement tueuses (NK) a été corrélé avec les résultats des études sur l'épreuve a par les cellules tumorales RECC‐CU60. L'inoculation des poussins d'un jour avec le surnageant de culture de JMV‐1 a entraîné, comparée aux témoins, une augmentation significative de l'activité des cellules NK dans la rate prélevée chez des poulets inoculés 12 jours plus tard JMV‐1. L'inoculation des poulets avec les cellules tumorales RECC‐CU60 a entraîné une suppression de l'activité des cellules NK. Le traitement des poulets avec le surnageant JMV‐1 à un jour d'âge avant l'épreuve par les cellules tumorales RECC‐CU60 a restauré et significativement augmenté l'activité des cellules NK. Ces résultats suggèrent que les lignées cellulaires JMV‐1 secrètent des lymphokines qui protègent vis‐à‐vis d'une épreuve avec les cellules tumorales RECC‐CU60 par stimulation directe ou indirecte de l'activité des cellules NK.

Zusammenfassung

Eintagsküken wurden intraperitoneal mit zellfreiem JMV‐1‐Kulturüberstand inokuliert und später, entweder im Alter von 7 oder von 12 Tagen, auf ihre Resistenz gegen eine letale Dosis von RECC‐CU60‐Tumorzellen geprüft. Eine im Vergleich zu allen anderen Behandlungsgruppen signifikante Reduzierung der Mortalität wurde bei Küken nachgewiesen, die mit JMV‐1 ‐Kulturüberstand geimpft worden waren, bevor ihre Resistenz gegen RECC‐CU60‐Tumorzellen im Alter von 12 Tagen geprüft wurde. Die Reduzierung des Serumgehalts des JMV‐1‐Kulturmediums oder die Änderung des Basismediums, in dem die JMV‐1‐Zellen gezüchtet wurden, hatten keinen Einfluß auf die Reduzierung der Mortalität; damit war nachgewiesen, daß die Schutzwirkungen gegen RECC‐CU60‐Tumorzellen auf Faktoren beruhten, die durch JMV‐1‐Zellen ins Kulturmedium abgesondert werden.

Die Entwicklung der Aktivität natürlicher Killer (NK)‐Zellen korrelierte mit den Befunden der Untersuchungen über die Resistenz gegen RECC‐CU60‐Tumorzellen. Die Impfung von Eintagsküken mit JMV‐1‐Kulturüberstand führte zu einer signifikanten Zunahme der Aktivität der NK‐Zellen in den am 12. Tag entnommenen Milzen im Vergleich zu Milzen von Küken aller anderen Versuchsgruppen. Die Inokulation von Küken mit RECC‐CU60‐Tumorzellen verursachte eine Hemmung der Aktivität ihrer NK‐Zellen. Die Behandlung von Küken mit JMV‐1‐Überstand am ersten Lebenstag, vor der Verabreichung von RECC‐CU60‐Tumorzellen, normalisierte und verstärkte signifikant die Aktivität ihrer NK‐Zellen. Diese Ergebnisse lassen darauf schließen, daß die Zellinie JMV‐1 Lymphokine absondert, die durch direkte oder indirekte Stimulierung der Aktivität von NK‐Zellen gegen RECC‐CU60‐Tumorzellen schützen.

Resumen

Pollitos de 1 día de edad fueron inoculados intraperitonealmente con un sobrenadante del cultivo celular JMV‐1 libre de células y expuestos posteriormente a una dosis letal de células neoplásicas RECC‐CU60 a la edad de 7 o 12 días. Se observó una reducción significativa de la mortalidad en los pollitos inoculados con el sobrenadante del cultivo celular JMV‐1 antes de administrar las células tumorales RECC‐CU60 a los 12 días de edad, comparando con el resto de los grupos. La reducción del contenido de suero del modio de cultivo de JMV‐1 o el cambio del medio base no tuvo efectos sobre la reducción de la mortalidad, demostrándose que los efectos protectores frente a la línea celular tumoral RECC‐CU60 eran el resultado de factores secretados en el medio de cultivo por la línea celular JMV‐1.

El desarrollo de la actividad de las células asesinas naturales (NK) estuvo correlacionada con los hallazgos obtenidos en los experimentos de infección con la línea celular RECC‐CU60. La inoculación de pollitos de 1 día de edad con el sobrenadante del cultivo de JMV‐1 produjo un incremento significativo de la actividad de células NK en los bazos tomados de pollos inoculados con JMV‐1 12 días más tarde si se comparaban con las bajas de las aves procedentes del resto de los grupos. La inoculación de los pollitos con la línea celular neoplásica RECC‐CU60 produjo una supresión de su actividad NK. El tratamiento de pollitos de 1 día de edad con el sobrenadante de JMV‐1, antes de la inoculación de RECC‐CU60, restauró e incrementó significativemente la actividad de células NK. Estos resultados sugieren que le línea celular JMV‐1 secreta linfoquinas que protejen frente a la inoculación de RECC‐CU60 al estimular directa o indirectamente la actividad de células NK.