Detection of retrovirus sequences in budgerigars with tumours

Summary

Renal tumours are a common neoplastic disease of budgerigars. Although a retro‐virus has been implicated as the aetiological agent, there is no definitive proof for this hypothesis. Sixteen birds suspected to have renal tumours were examined in an attempt to elucidate the possible role of retroviruses. Thirteen birds had renal tumours and the majority of these birds showed abdominal enlargement and paresis. Renal masses were detected by radiography in nine birds. Post‐mortem examination confirmed the presence of abdominal tumours which were mostly confined to the kidneys. All of the renal tumours were carcinomas. ELISA tests to detect the presence of p27 of avian leukosis virus and virus isolation attempts were negative. DNA from eight tumours was examined by dot‐blot hybridization for the presence of sequences hybridizing with a full length clone of the RAV‐2 strain of the avian leukosis virus. A positive reaction was detected with DNA from 6/8 tumours. Southern blot hybridization demonstrated the presence of a 7.2 kb fragment following restriction with BamHI and a 4.6 kb fragment in an additional tumour following digestion with EcoRI that were recognized by the RAV‐2 probe. These results suggest the presence of a retrovirus in tumours of budgerigars.

Resume

Les tumeurs rénales sont une maladie néoplasique courante chez les perruches ondulées. Bien qu'un retrovirus ait été impliqué comme agent étiologique, il n'existe pas de preuve formelle pour confirmer cette hypothèse. Seize oiseaux suspectés de souffrir de tumeurs rénales ont été examinés afin d'essayer d'élucider le rôle possible des rétrovirus. Treize oiseaux avaient des tumeurs rénales et la majorité présentait une dilatation abdominale et une parésie. La présence de masses rénales a été décelée par radiographie chez neuf sujets. L'autopsie a confirmé la présence de tumeurs abdominales, limitées pour la plupart aux reins. Toutes les tumeurs rénales étaient cancéreuses. Les tests ELISA pour détecter la présence de p27 du virus de leucose aviaire et les essais d'isolation du virus ont été négatifs. L'ADN de huit tumeurs a été examinée par hybridation “dot‐blot” pour rechercher la présence de séquences d'hybridation avec la pleine longueur d'un clone de la souche RAV‐2 de virus de leucose aviaire. Une réaction positive a été observée avec l'ADN de six tumeurs sur huit. L'hybridation “Southern blot” a démontré la présence d'un fragment de 7.2 kilobase aprés restriction avec BamHI et d'un fragment de 4.6 kilobase dans une tumeur supplémentaire après digestion avec EcoRI, reconnus par la sonde RAV‐2. Ces résultats suggèrent la présence d'un rétrovirus dans les tumeurs des perruches ondulées.

Zusammenfassung

Nierentumoren sind eine verbreitete neoplastische Erkrankung von Wellensittichen. Obwohl ein Retrovirus als das ätiologische Agens vermutet worden ist, gibt es keinen definitiven Beweis für diese Hypothese. Sechzehn Vögel mit dem Verdacht auf Nierentumoren wurden in einem Versuch, die mögliche Rolle von Retroviren aufzuklären, untersucht. Dreizehn Vögel hatten Nierentumoren, und bei der Mehrzahl dieser Tiere lag eine Abdomenerweiterung und Lähmung vor. Nierenmassen wurden durch Röntgenuntersuchung bei neun Vögeln festgestellt. Bei der Sektion bestätigte sich das Vorliegen von Leibeshöhlentumoren, die meist auf die Nieren beschränkt waren. Sämtliche Nierentumoren waren Karzinome. ELISA‐Tests zum Nachweis von p27 des aviären Leukosevirus und Versuche zur Virusisolierung waren negativ. DNS von acht Tumoren wurde durch Dot‐Blot‐Hybridisierung auf das Vorhandensein von Sequenzen untersucht, die mit einem Klon voller Länge des Stammes RAV‐2 des aviären Leukosevirus hybridisieren. Eine positive Reaktion war mit DNS aus 6 von 8 Tumoren nachzuweisen. Die Southern Blot Hybridisierung erwies das Vorhandensein eines 7.2 Kilobasen‐Fragments nach Restriktion mit BamHI und eines 4.6 Kilobasen‐Fragments nach Verdaunung mit EcöRI, die durch die RAV‐2 Sonde erkannt wurden. Diese Ergebnisse lassen auf das Vorhandensein eines Retrovirus in Tumoren bei Wellensittichen schließen.

Resumen

Los tumores renales son procesos neoplàsicos comunes en periquitos. Aunque se ha consider‐ado a un retrovirus como el agente etiológico de los mismos, no existe una prueba definitiva que confirme esta hipótesis. En un intento de elucidar el posible papel de los retrovirus, se examinaron 16 aves sospechosas de presentar tumores renales. De ellas, 13 tenían tumores renales y la mayoría de estas aves mostraron un incremento del tamaño del abdomen y paresia. Se detectaron masas renales mediante radiograf fa en nueve aves. El estudio anatomopatológico confirmó la presencia de tumores abdominales que se encontraban confinados principalmente a los riñones. Todos los tumores renales fueron carcinomas. El método de ELISA utilizado para detectar la presencia de p27 del virus de la leucosis aviar y los intentos de aislamiento de virus dieron resultados negativos. Se examinó el ADN de ocho tumores mediante hibridación dot‐blot para detectar la presencia de secuencias hibridizantes con un clon completo de la cepa RAV‐2 del virus de la leucosis aviar. Se detectó una reacción positiva en el ADN de 6/8 tumores. La hibridación Southern blot demostró la presencia de un fragmento de 7.2 kilobases después de realizar una restricción con BamHI y un fragmento de 4.6 kilobases en otro tumor después de realizar una digestion con EcoRI que fue reconocido por la sonda RAV‐2. Estos resultados sugieren la presencia de un retrovirus en las neoplasias de los periquitos.

Notes

Present address: California Veterinary Diagnostic Laboratory, 2789 S Orange Ave, Fresno, CA 73725, USA.

Address correspondence to K. A. Schat