Virus serological diagnosis in two Avian species based on binding of human C1q to Avian antibody

Summary

Diagnosis of infectious diseases in birds using direct assays such as conventional ELISA or immunofluorescence require antibody directed to IgG of each avian species. In this study, we tested binding of human C1q to different antigen‐antibody complexes of two avian species in a sandwich immunofluorescent complement fixation test (S‐ICFT). The reaction was as follows: virus (in cells) + decomplemented avian serum + human‐C1q + goat anti‐human‐C1q + fluorescein isothiocyanate rabbit anti‐goat‐IgG. Positive and negative chicken (order Galliformes) sera against chicken anaemia virus (CAV) and sera against avian pox virus as well as positive and negative sera against chicken pox virus raised in a milvago chimango (order Falconiformes) were used. Positive sera of either avian species demonstrated clear fluorescent staining of infected cells while negative sera did not show any reaction. This demonstrated that both chicken and milvago chimango antibodies were able to bind human C1q. Since both avian species tested belonged to different orders, we believe that antibodies of other avian species will also bind human Clq allowing serological surveys in feral birds through S‐ICFT.

Resume

Le diagnostic des maladies infectieuses des volailles utilisant des tests directs telle l'ELISA conventionnelle ou rimmunofluorescence requiert des anticorps dirigés contre les IgG de chaque espèce aviaire. Dans cette étude, il a été étudié la liaison du Clq humain à différents complexes antigène‐anticorps de deux espèces aviaires à l'aide d'un test sandwich de fixation du complément par immunofluorescence (S‐ICFT). La réaction a été la suivante: virus (dans les cellules) + sérum aviaire décomplémenté + C1q humain + anti C1q humain de chèvre + IgG anti‐chèvre de lapin à l'isothiocyanate de fluorescéine. Des sérums de poulets positifs et négatifs (ordre des Galliformes) contre le virus de l'anémie du poulet et des sérums contre le virus de la variole aviaire aussi bien que des sérums positifs et négatifs contre le virus de la variole du poulet obtenus sur Milvago Chimango (ordre des Falconiformes) ont été utilisés. Les sérums positifs de chaque espèce aviaire ont montré une fluorescence nette des cellules alors que les cellules négatives n'ont montré aucune réaction. Ces résultats démontrent qu'à la fois les anticorps de poulets et de Milvago Chimango sont capables de se lier au Clq humain. Bien que ces deux espèces aviaires appartiennent à des ordres différents, il est probable que les anticorps des autres espèces aviaires se lient également au Clq humain permettant des enquêtes sérologiques chez les oiseaux sauvages à l'aide du S‐ICFT.

Zusammenfassung

Die Diagnose von Infektionskrankheiten bei Vögeln mit Hilfe direkter Nachweisverfahren wie dem konventionellen ELISA oder der Immunfluoreszenz erfordert Antikörper gegen IgG jeder Vogelspezies. In der vorliegenden Studie prüften wir die Bindung von Human‐Clq an verschiedene Antigen‐Antikörper‐Komplexe von zwei Vogelarten in einer Sandwich‐Immunfluoreszenz‐Komplementbindungsreaktion (S‐IKBR). Die Reaktion war folgendermaßen: Virus (in Zellen) + dekomplementiertes Vogelserum + Human‐C1q + Ziegenantikörper gegen Human‐C1q + Fluorescein‐markierte Kaninchenantikörper gegen Ziegen‐IgG. Positive und negative Seren vom Huhn (Ordnung Galliformes) gegen Hühneranämievirus (CAV) und Seren gegen Vogelpockenvirus sowie in einem Chimango (Ordnung Falconiformes) produzierte positive und negative Seren gegen Hühnerpockenvirus wurden verwendet. Die positiven Seren beider Vogelarten ergaben eine deutliche Fluoreszenzfärbung infizierter Zellen, während negative Seren keinerlei Reaktion bewirkten. Das zeigte, daß sowohl Hühner‐ als auch Chimango‐Antikörper in der Lage waren, Human‐C1q zu binden. Da die beiden untersuchten Vogelspezies zu unterschiedlichen Ordnungen gehörten, glauben wir, daß Antikörper anderer Vogelarten ebenfalls Human‐Clq binden und somit serologische Erhebungen bei Wildvögeln durch die S‐IKBR zulassen werden.

Resumen

El diagnóstico de enfermedades infecciosas aviaros empleando métodos directos como un ELISA convencional o inmunofluorescencia requiere anticuerpos para IgG de la especie aviar en particular. En este estudio comprobamos la unión de Clq humano a diferentes inmuno‐complejos de dos especies aviares empleando un método de sandwich de inmunofluorescencia‐fijación de complemento (S‐ICFT). El método es el siguiente: virus (en células) + suero aviar libre de complemento + Clq humano + suero de cabra anti C1q humano + suero de conejo ami IgG de cabra marcado con fluoresceina. Se emplearon sueros de gallina (orden Galli‐forme) positivos y negativos para el virus de la anemia de los pollos (CAV) y sueros frente al virus de la viruela aviar en un halcón chimango (orden Falconiforme). Los sueros positivos de ambas especies dieron una reacción de inmunofluorescencia clara en células infectadas mientras que los sueros negativos no. Estos resultados demostraron que tanto el suero de las gallinas como el del halcón fueron capaces de unirse a Clq humano. Puesto que ambas especies aviares pertenecen a órdenes diferentes consideramos que los anticuerpos de otras especies aviares se unirán también a Clq humano con lo que se podrán realizar estudios serológicos en aves salvajes mediante el método S‐ICFT.