Cross‐reactive cellular immune responses in chickens vaccinated with live infectious bronchitis virus vaccine

Summary

Two‐week‐old chickens were vaccinated intra‐nasally with a live infectious bronchitis virus (IBV) vaccine (H120). On days 4, 7, 11 and 14 post‐vaccination (p.v.) spleen mononuclear cells (MNC) prepared from control and vaccinated chickens were stimulated in vitro with homologous (strain M41) and heterologous (strains 7 and 793/B) virus antigens. Antigen‐specific lymphoproliferation and interleukin‐2 (IL‐2) and interferon‐y (IFN) production were used to measure cross‐reactive cell mediated immune responses. In antigen‐specific lymphoproliferation assays, it was found that while 4/16 vaccinated birds responded to the homologous antigen, only one responded to an heterologous antigen (strain 7). However, IL‐2 production was seen in the supernatants of spleen MNC from vaccinated chickens stimulated with all three antigens. Production of IFN was also demonstrated in samples stimulated with the homologous and one heterologous (strain 7) antigen. Thus it appears that, following vaccination of chickens with live IBV vaccine, cross‐reactive cellular immune responses occur that vary in magnitude with the strain of IBV used for in vitro stimulation.

Résumé

Des poulets âgés de deux semaines ont été vaccinés par instillation nasale avec un vaccin à virus vivant de la bronchite infectieuse (H120) (IBV). Les cellules mononuclées (MNC) ont été prélevées à partir de la rate les 4è, 7è, 11è, et 14è jours après la vaccination (p.v.), chez des poulets vaccinés et témoins, puis ont été stimulées in vitro par des antigènes viraux homologue (souche M41) et hétérologues (souches 7 et 793/B). La lymphoprolifération spécifique de l'antigène ainsi que la production d'interleukine‐2 (Il‐2) et d'interféron γ (IFN) ont été utilisées pour mesurer les réponses immunitaires à médiation cellulaire croisée. Dans les essais de lymphoprolifération spécifique de l'antigène, il a été observé que 4/16 oiseaux vaccinés répondaient à l'antigène homologue, et un seul répondait à l'antigène hétérologue (souche 7) Néanmoins, la production de IL‐2 a été observée dans les surnageants de MNC de rate stimulées par les trois antigènes et provenant de poulets vaccinés. La production d'interféron a également été mise en évidence dans les échantillons stimulés par l'antigène homologue et un des antigènes hétérologues (souche 7). Ainsi, il apparaît qu'à la suite de la vaccination des poulets avec un vaccin à virus vivant, des réponses immunitaires à médiation cellulaire apparaissent et varient en intensité suivant la souche d'IBV utilisée pour la stimulation.

Zusammenfassung

Zwei Wochen alte Küken wurden intranasal mit einer Bronchitisvirus (IBV)‐Lebendvakzine (H120) geimpft. Am 4., 7., 11. und 14. Tag post vaccinationem (p.v.) wurden mononukleäre Zellen (MNC) aus der Milz von vakzinierten Küken und Kontrollen gewonnen und in vitro mit Virusantigenen des homologen Stammes M41 und der heterologen Stämme 7 und 793/B stimuliert. Die antigenspezifische Lymphoproliferation und die Produktion von Interleukin 2 (IL‐2) und γ‐Interferon (IFN‐γ) wurden benutzt, um die kreuzreaktiven zeilvermittelten Immunantworten zu messen. Bei Untersuchungen der antigenspezifischen Lymphoproliferation wurde festgestellt, daß 4 von 16 vakzinierten Tieren gegen das homologe Antigen reagierten, aber nur eins gegen ein heterologes Antigen (Stamm 7). Die Produktion von IL‐2 wurde jedoch nach der Stimulierung der Milz‐MNC von vakzinierten Küken mit allen drei Antigenen in den Überständen festgestellt. Die Produktion von IFN wurde ebenfalls in den mit den homologen Antigenen und einem heterologen Antigen (Stamm 7) stimulierten Proben festgestellt. Es scheint somit, daß nach der Impfung von Hühnern mit IBV‐Lebendvakzine kreuzreaktive zelluläre Immunantworten vorkommen, die in ihrer Größenordnung mit dem für die Stimulierung in vitro verwendeten IBV‐Stamm varieren können.

Resumen

Se vacunaron pollitos de dos semanas de edad por vía intranasal con una cepa viva (H120) de virus de la bronquitis infeciosa (IBV). Se preparon células mononucleres esplénicas (MNC) los días 4, 7, 11 y 14 postvacunación (p.v.) a partir de aves controles y aves vacunadas y fueron estimuladas in vitro con antigenos virales de una cepa homóloga (M41) y cepas heterólogas (7 y 793/B). Se utilizó la proliferación linfoide específica de antígeno así como la producción de interleucina 2 (IL‐2) y el interferon gamma (IFN) para medir las respuestas inmunes celulares cruzadas. En las pruebas de proliferación linfoide se observó que mientras las aves vacunadas con 4/16 respondían al antígeno homólogo sólamente una respondió al antígeno heterólogo (cepa 7). No obstante, hubo producción de IL‐2 en los sobrenadantes de MNC esplénicos procedentes de aves vacunadas estimuladas con los tres antígenos. La producción de IFN se demostró también en las muestras estimuladas con el antígeno homólogo y con uno heterólogo (cepa 7). Parece ser que tras la vacunación de pollitos con una vacuna viva de IBV se producen respuestas celulares inmunes cruzadas de distinta magnitud dependiendo de la cepa de IBV empleada en la estimulación in vitro.

Notes

Corresponding author.