Caulogénèse et synthèse terpénique in vitro chez la Menthe poivrée

Summary

Regenerated buds from in vitro cultured leaves of Peppermint (Mentha x piperita) have been obtained on a MS/2 medium supplemented with saccharose (20 g.l⁻¹) and various concentrations (0,5 mg.l⁻¹ et 2 mg.l⁻¹) of BAP. Best results were observed using young leaves from in vitro micropropagated plants, cultivated in the dark. Different stages of differentiation during cauloge- nesis were characterized by Scanning Electron Microscopy (SEM). After 5 days, a meristematic area developed from the base of the leaf. Ten days further neo-formed buds could be observed and a secretory system was early differentiated. Gas Chromatography (GC) analysis revealed terpene accumulation in the glandular structures.

Résumé

Un protocole de caulogénèse a été mis au point à partir de feuilles de Menthe (Mentha x piperita) cultivées in vitro. Le milieu optimal de régénération est le milieu MS (Murashige et Skoog, 1962) dilué deux fois, additionné de saccharose (20 g.l⁻¹) et de BAP à des concentrations comprises entre 0,5 mg.l⁻¹ et 2 mg.l⁻¹. Les conditions optimales de régénération sont obtenues en utilisant des jeunes feuilles (première paire de feuilles étalées) prélevées sur des vitroplants et cultivées à l'obscurité. L'utilisation de feuilles âgées et celle de conditions d'éclairements intenses sont deux facteurs qui inhibent la régénération. Des observations en MEB (Microscopie Éléctronique à Balayage) après 5 jours de culture ont permis de localiser la zone organogène à la base du limbe. Les bourgeons néoformés se différencient après environ 15 jours de culture. La différenciation d'un système sécréteur sur ces bourgeons a été observée. Les analyses en CPG (Chromatographie en Phase Gazeuse) montrent que ce système sécréteur est fonctionnel et accumule des composés terpéniques.

Key-words:

• Mentha × piperita
• leaf cultur
• caulogenesis
• SEM
• GC