A Blood Cell Column Technique for Purification of Rheumatoid Factor

Summary

A blood cell column technique for purifying the rheumatoid factor(s) participating in the Waaler-Rose-agglutination reaction is described. Sensibilized sheep erythrocytes are distributed among a supporting medium in a column, and prepared serum or serum fractions with rheumatoid factor activity are passed slowly through the column at pH 7.4.

Adsorbed rheumatoid factor is eluted with a 0.15 M phosphate buffer pH 5.5.

Attempts to determine the most suitable conditions for adsorption and elution of rheumatoid factor, such as temperature conditions and degree of sensibilization of the blood cells, are reported, together with preliminary results obtained by utilizing blood cell columns for separation of rheumatoid factor.

Zusammenfassung

Der Verfasser beschreibt ein technisches Verfahren zur Reinigung des an der Waaler-Rose-Agglutinationsreaktion beteiligten Rheumatoidfaktors mit Säulen von Blutkörperchen. Sensibilisierte Schaferythrocyten werden in einer Säule mit einem Bindemittel vermischt und das präparierte Serum oder Bruchteile desselben mit der Wirksamkeit des Rheumatoidfaktors werden langsam durch die Säule mit pH = 7.4 geführt.

Der adsorbierte Rheumatoidfaktor wird mit einem 0.15 M Phosphatpuffer mit pH = 5.5 eluiert.

Versuche zur Bestimmung der am besten geeigneten Bedingungen für die Adsorption und Elution des Rheumatoidfaktors, wie die Temperaturverhältnisse und der Sensibilisierungsgrad der Blutzellen werden besprochen im Zusammenhang mit präliminären Ergebnissen bei Verwendung von Blutzellensäulen für die Trennung des Rheumatoidfaktors.

Résumé

L'auteur décrit un procédé technique basé sur des colonnes de globules sanguins ayant pour but de purifier le facteur rhumatoïde participant à la réaction d'agglutination de Waaler-Rose. Des érythrocytes sensibilisés de mouton sont distribués dans une colonne comportant un milieu de support. En suite le sérum préparé ou des fractions de sérum avec activité du facteur rhumatoïde sont passés lentement par la colonne à un pH = 7.4.

Le facteur rhumatoïde adsorbé est élué avec un tampon de phosphate à 0.15 M et pH = 5.5.

Les efforts visant à déterminer les conditions les plus favorables pour l'adsorption et l'élution du facteur rhumatoïde, telles que les effets de la température et le degré de sensibilisation des globules sanguins sont exposés ainsi que les résultats préliminaires obtenus en utilisant les colonnes de globules sanguins pour la séparation du facteur rhumatoïde.