Application of a PCR method for the diagnosis of ulcerative enteritis: preliminary results

Abstract

Ulcerative enteritis or “quail disease” is an acute clostridial infection of young birds reported in many avian species, chicken and turkey included. Clostridium colinum is the causative agent of ulcerative enteritis and because of the difficulties bound to the isolation and identification of this bacterium by means of classic bacteriological techniques, its detection appears very hard and the prevalence of this disease could be underestimated. To investigate the diffusion of C. colinum in enteric disease of birds, a recently developed PCR protocol was applied to 42 cultural broths previously inoculated with organs and intestinal samples collected from diseased subjects. PCR-positive broths were cultivated to attempt the isolation of C. colinum. Samples collected from positive birds were subjected to histological examinations. 4 birds (3 broilers chickens and 1 pigeon) resulted PCR-positive and, in one case, C. colinum was isolated. Gross and histological lesions of positive birds were compatible with those described in other ulcerative enteritis outbreaks. These preliminary results demonstrates that C. colinum is sporadically implicated in enteric diseases of broiler chickens (14.2%). In addition, the PCR assay proved to be an useful and reliable instrument to support the diagnosis of ulcerative enteritis and to facilitate the isolation of C. colinum.

Riassunto

L’enterite ulcerativa o “quail disease” è il risultato di un’infezione acuta da Clostridium colinum che colpisce prevalentemente soggetti giovani e che è stata descritta in molte specie aviari, pollo e tacchino compresi. La diagnosi di tale patologia attraverso tecniche di microbiologia tradizionali risulta particolarmente indaginosa a causa dei lunghi tempi richiesti dall’esame batteriologico e dalla mancanza di terreni colturali selettivi. Con il presente studio si è voluta indagare l’utilità dell’applicazione di un protocollo in PCR nella diagnosi dell’enterite ulcerativa. A tale scopo una PCR specifica per C. colinum è stata applicata a 42 brodi colturali d’arricchimento precedentemente inoculati con materiale patologico prelevato da soggetti affetti da sindrome enterica. Successivamente gli organi e i campioni intestinali dei soggetti risultati positivi alla PCR, sono stati sottoposti ad accertamenti istopatologici. 3 broiler e 1 piccione sono risultati positivi alla PCR e in uno di questi casi è stato isolato C. colinum. Le lesioni anatomopatologiche e istologiche dei soggetti positivi erano compatibili con quelle descritte in altri episodi di enterite ulcerativa. Questi risultati dimostrano che la PCR è uno strumento utile ed affidabile per la diagnosi di enterite ulcerativa e può essere utilizzata come supporto all’isolamento di C. colinum. Inoltre, dai risultati preliminari, C. colinum appare sporadicamente (14,2%) implicato nelle patologie enteriche che colpiscono i broiler in Italia.

Key words:

• Diagnosis
• Ulcerative enteritis
• Clostridium colinum
• PCR

Parole chiave::

• Diagnosi
• Enterite ulcerativa
• Clostridium colinum
• PCR