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Zusammenfassung
Die Verabreichung von 3 μg Dexamethason am 8. Inkubationstag in die Allantoishöhle führte bei 15‐tägigen Embryonen zu verschiedenartigen Embryopathien. Die H‐AFP und Serumalbumin‐Konzentrationen lagen am 12. Inkubationstag signifikant (P<0,01) unterhalb der entsprechenden Kontrollwerte, während das Serum‐Gesamtprotein an diesem Meβzeitpunkt schwach signifikant erniedright war. Am 15. Inkubationstag unterschieden sich die H‐AFP‐Konzentrationen nicht von den Kontrollwerten; demgegenüber waren die Serumalbumingehalte im Vergleich zu den entsprechenden Kontrollwerten am 15. Inkubationstag hoch signifikant erniedrigt. Die Serumproteingehalte lagen schwach signifikant unterhalb der entsprechenden Kontrollwerte. Somit bietet sich dieser Verabreichungsmodus von Dexamethason für die Induktion einer selektiven Serumalbumin‐Erniedrigung am 15. Inkubationstag an.
Nach Verabreichung von 2 IE Insulin am 1. Inkubationstag in den Dottersack entwickelte ein Drittel der Embryonen Embryopathien. H‐AFP, Serumalbumin sowie Serumgesamtprotein unterschieden sich weder am 12. noch am 15. Inkubationstag von den Kontrollwerten.
Nach Applikation von 100 μg Adrenalin in die Allantoishöhle am 6. Inkubationstag konnten nur in Einzelfällen Embryopathien beobachtet werden. Die H‐AFP‐Werte ebenso wie die Gesamtproteinwerte unterschieden sich weder am 12. noch am 15. Inkubationstag statistisch signifikant von den Kontrollen. Demgegenüber lag der Durchschnittswert für Serumalbumin am 12. Inkubationstag signifikant unterhalb des entsprechenden Kontrollwertes.. Am 15. Inkubationstag unterschieden sich die Messwerte für Serumalbumin statistisch nicht von den entsprechenden Kontrollwerten.
Die Häufigkeit von Embryopathien sowie die Veränderungen der H‐AFP‐ und Serumalbumin‐Spiegel lieβen deutliche Abhängigkeiten von der Menge des verabreichten Thyroxins und vom Zeitpunkt der Verabreichung erkennen. So führte die Verabreichung von 2 μg L‐Thyroxin am 2. Inkubationstag nur in Einzelfällen zu Embryo‐pathien. Die H‐AFP‐Werte waren am 12. Inkubationstag schwach signifikant und am 15. Inkubationstag hoch signifikant im Vergleich zu den Kontrollen erniedrigt. Demgegenüber zeigten die Serumal‐bumin‐ sowie die Serum‐Gesamtprotein‐Werte weder am 12. noch am 15. Inkubationstag statistich signifikante Unterschiede. Ähnliche Ergebnisse erbrachte die Verabreichung von 2 μg Thyroxin am 3. Inkubationstag. Somit erscheint hinsichtlich einer selektiven Beein‐flussung der H‐AFP‐Synthese die. Verabreichung von 2 μg Thyroxin am 2. oder 3. Inkubationstag als besonders geeignet.
Nach Verabreichung von 10μg Thyroxin am 6. Inkubationstag lieβen sich, insbesondere am 12. Inkubationstag, in 80% der Falle Embryo‐pathien in Form von Leberveränderungen beobachten. Die HAFP‐und Serumalbumin‐Werte lagen am 12. sowie dem 15. Inkubationstag hoch signifikant unterhalb der entsprechenden Kontrollwerte. Das Serum‐Gesamtprotein war am 12. Inkubationstag signifikant und am 15. Inkubationstag schwach signifikant erniedrigt.
Die Ergebnisse dieser Untersuchungen zeigen Möglichkeiten auf, die H‐AFP‐Synthese ebenso wie die Albumin‐Synthese beim Hühner‐embryo durch Application von Hormonen wie Dexamethason, Adrenalin und L‐Thyroxin selektiv zu beeinflussen. Damit konnten die hier vorgestellten Beobachtungen als Beitrag für die Erforschung chemisch induzierter teratologischer einschliepβlich pathophysiologischer Prozesse unter Verwendung des Hühnerembryo als Modell dienen.
Summary
Administration of 3 μg dezamethasone at day 8 of incubation into the allantoic cavity resulted in various embryopathies in embryos by the 15th day of incubation. Chicken alpha‐foetoprptein (chAFP) and serum albumin concentrations, when examined at the 12th day of incubation, were below the corresponding controls (P<0.01), whereas total serum protein was only slightly lower, On day 15 chAFP concentrations were similar to those of the controls, serum albumin values were markedly reduced and total serum protein was significantly decreased. The results suggested a selective reduction of serum albumin synthesis in the 15‐day‐old chick embryo.
Following administration of 2 IU insulin on the first day of incubation, into the yolk sac, one third of the embryos developed embryopathies. ChAFP, serum albumin and whole serum protein values were unchanged on either the 12th day or 15th day of incubation.
Inoculation of 100 μg adrenaline into the allantoic cavity on the sixth day of incubation resulted in embryopathies in only a few instances. ChAFP total serum protein values were not affected. However, serum albumin concentrations were significantly lower on the 12th day, but not on the 15th.
The responses to L‐thyroxine were both time‐ and dose‐dependent. Inoculation of 2 μg thyroxine on the second day of incubation resulted in few embryopathies. ChAFP levels were significantly lower on the 12th and 15th day of incubation. In contrast, serum albumin and total serum protein concentrations were normal at both times. Similar results were obtained when 2 μg of thyroxine were administered at the third day of incubation. Thus in order to inhibit selectively chAFP synthesis, administration of 2 μg thyroxine on day 2 or 3 of incubation is suggested.
When 10 μg thyroxine were injected on day 8 of incubation, 80% óf the embryos showed embryopathies on day 12 of incubation. ChAFP and serum albumin levels were markedly depressed. The concentration of total serum protein was significantly decreased on day 12 but less so, though still significantly, on day 15.
These results demonstrate the possibility to influence selectively chAFP and serum albumin synthesis, thereby facilitating studies on chemically induced teratological, including pathophysiological, processes in the avian embryo.
Resume
L'administration de trois microgrammes de dexaméthasone au 8ème jour d'incubation dans la cavité allantoïque s'est traduite par l'apparition d'embryopathies variées chez tous les embryons au 15ème jour d'incubation. Les concentrations d'alpha‐foetoprotéine de poulet (chAFP) et de sérum albumine ont été déterminées le douzième jour d'incubation et se sont révélées être inférieures aux témoins correspondants (P<0,01 ) alors que les valeurs des protéines sériques totales n'étaient que légèrement moindres. Au 15ème jour d'incubation, les concentrations de chAFP étaient similaires à celles des témoins, mais les valeurs de sérum albumine étaient nettement réduites et celles des protéines sériques totales significativement diminuées. Ces résultats suggèrent une réduction sélective de la synthèse de la sérum albumine chez les embryons de poulets de 15 jours.
Après administration de deux U.I. d'insuline le premier jour d'incubation dans le vitellus, un tiers des embryons a développé une embryopathie. Les valeurs de chAFP de sérum albumine et de protéines sériques totales sont restées inchangées que ce soit au 12è ou au 15è jours d'incubation.
L'inoculation de 100 microgrammes d'adrénaline dans la cavité allantoïque le 6ème jour d'incubation n'a entraîné que quelques embryopathies. Les concentrations de chAFP et de protéines sériques ont été inchangées alors que celles de sérum albumine ont été significativement plus faibles le 12ème jour mais pas le 15ème.
Les réponses à la L‐thyroxine ont été fonction de la dose et du moment de l'administration. L'inoculation de 2 microgrammes de thyroxine le second jour d'incubation a entraîné quelques embryopathies. Le niveau de chAFP a été significativement plus bas le 12ème et le 15ème jour d'incubation mais ceux des sérums albumine et des protéines sériques totales ont été normaux aux mêmes jours. Des résultats similaires ont été obtenus lorsque 2 microgrammes de thyroxine ont été administrés le 3ème jour d'incubation. C'est dans le but d'inhiber sélectivement la synthèse de chAFP que l'administration de 2 microgrammes de thyroxine a été suggérée au 2ème ou au 3ème jour d'incubation.
Quand 10 microgrammes de thyroxine sont injectés le 8ème jour d'incubation, 80% des embryons montrent des embryopathies le 12ème jour d'incubation. Le taux de chAFP et de sérum albumine est considérablement diminué, celui des protéines sériques totales également le 12ème jour, mais à un degré moindre, bien que significatif, le 15ème jour.
Ces résultats démontrent la possibilité d'influencer sélectivement la synthèse de chAFP et de sérum albumine et par conséquent de faciliter l'étude des processus tératologiques induits chimiquement, incluant la pathophysiologie, chez l'embryon de poulet.
Resumen
La administración de 3 μg de dexametasona a los 8 días de incubación dentro de la cavidad alantoidea conduce al desarrollo de embriopatias en todos los embriones hacia los 15 días de incubación. Las concentraciones de alfa‐fetoproteína (AFPpo) y de albúmina sérica estaban abajo de las concentraciones mostradas por los controles a los 12 días de incubación, mientras que el nivel de proteínas séricas totales sólamente estaba ligeramente disminuido. En el día 15, las concentraciones de AFPpo fueron similares a las de los controles; los valores de albúmina sérica estaban marcadamente reducidos y el total de proteína sérica estaba significantemente disminuida. Los resultados sugieren la presencia de una reducción selectiva de la síntesis de la albúmina sérica en los embriones de pollo de 15 días de edad.
Al administrarse 2 UI de insulina durante el primer día de incubación en el sa co vitelino, una tercera parte de los embriones desarrollaron embriopatias. Los valores de AFPpo, albúmina y proteína séricas no variaron a los 12 y 15 días de incubación.
La inoculación de 100 μg de adrenalina en la cavidad alantoidea en el sexto día de incubación produjo embriopatias en solamente pocos casos. Los valores totales de proteína sérica y de AFPpo no fueron afectados, sin embargo, las concentra‐siones de albúmina sérica disminuyeron significativamente durante el día 12, pero no el día 15.
Las respuestas a la L‐tiroxina dependieron tanto del tempo como de la dosis. La inoculación de 2 μg de tiroxina al segundo día de incubación provocó pocas embriopatias. Los niveles de AFPpo bajaron considerablemente los días 12 y 15 de incubación. En contraste, las concentraciones de proteína sérica total y de albúmina sérica fueron normales en ambas ocasiones. Se obtuvieron resultados similares cuando se administraron 2 μg de tiroxina al tercer día de incubación; por lo tanto, se sugiere la administración de 2 μg de tiroxina durante el día 2 ó 3 de incubación.
Cuando 10 ug de tiroxina fueron inyectados el día 8 de incubación, el 80% de embriones mostraron embriopatias en el día 12 de incubación. Los niveles de AFP de pollo y de albúmina sérica fueron profundamente deprimidos. La concentración de proteína total en suero fue significativamente disminuida durante el día 12 o antes, así como también hasta el día 15.
Estos resultados demuestran la posibilidad para influenciar selectivamente la AFP de pollo y la síntesis de albúmina sérica, facilitando por lo tanto, los estudios de teratología inducida químicamente, incluyendo los procesos patofisiológicos en el embrión de pollo.
Notes
Mit Unterstützung dei Deutschen Forschungsgemeinschaft (Ne 221/3).