In vitro evaluation of the antioxidant and anti-inflammatory activities of sulphated metabolites of catechins
Evaluación in vitro de las actividades antioxidante y antiinflamatoria de metabolitos sulfatados de catequinas

Figures & data

Supplementary Figure 1. Structure of catechins.

Figura 1. Estructura de catequinas.

Supplementary Figure 2. Chromatogram recorded at 280 nm showing the profile of the epicatechin monosulphates obtained upon synthesis. Peaks are identified as (1) epicatechin-5-O-sulphate, (2) epicatechin-3′-O-sulphate, (3) epicatechin-7-O-sulphate, (4) epicatechin-4′-O- sulphate, and (5) epicatechin.

Figura 2. Cromatograma registrado a 280 nm donde se muestra el perfil de monosulfatos de epicatequina obtenidos en la reacción de síntesis. Los picos corresponden a (1) epicatequina-5-O-sulfato, (2) epicatequina-3′-O-sulfato, (3) epicatequina-7-O-sulfato, (4) epicatequina-4′-O-sulfato, y (5) epicatequina.

Supplementary Figure 3. UV spectra of epicatechin-4′-O-sulphate (dotted line) and epicatechin (continuous line).

Figura 3. Espectros UV de epicatequina-4′-O-sulfato (línea de puntos) y de epicatequina (línea continua).

Supplementary Figure 4. Percentage of inhibition in NO production secreted by different catechins and their sulphated derivatives. The data are expressed as the average±standard deviation of three independent experiments. Values with an asterisk (*) are significantly different compared to controls (cells treated in the same way without catechins) (p <0.05).

Figura 4. Porcentaje de inhibición en la producción de NO secretado inducido por las catequinas y sus derivados sulfatados. Los resultados están expresados como media±desviación estándar de tres experimentos independentes. Los valores señalados con un asterisco (*) muestran diferencias significativas con respecto a los controles (células cultivadas en condiciones idénticas pero sin catequinas) (p <0.05).

Supplementary Table 1. Chromatographic, UV and mass spectral data obtained for epicatechin and their monosulphated metabolites. Peak numbers refer to Figure 2.
Tabla 1. Tiempo de retención en HPLC, longitud de onda de máxima absorción en el UV y datos de espectrometría de masas obtenidos para epicatequina y sus derivados sulfatados. La numeración de los picos hace referencia a la Figura 2.

Compounds	Peak number	Retention time (min)	λmax (nm)	Pseudo-molecular ion [M-H]^− (m/z)	MS^2 spectra
Epicatechin 5-O-sulphate	1	2.6	278	369	217, 245, 289
Epicatechin 3′-O-sulphate	2	2.8	277	369	231, 245, 289
Epicatechin 7-O-sulphate	3	2.2	275	369	217, 245, 289
Epicatechin 4′-O-sulphate	4	3.6	274	369	231, 245, 289
Epicatechin	5	5.7	279	289	123, 139, 165

Supplementary Table 2. TEAC values of antioxidant activity of the assayed compounds.
Tabla 2. Valores TEAC de actividad antioxidante de los compuestos estudiados.

Compounds	ABTS/peroxidase assay	ABTS/persulphate assay	FRAP
Catechin	1.34 ± 0.02^d	3.84 ± 0.01^f	1.53  ± 0.22^c
Epicatechin	2.07 ± 0.09^e	4.26 ± 0.25^f	1.34 ± 0.01^b,c
Catechin 3′-O-sulphate	2.00 ± 0.12^e	2.35 ± 0.04^e	1.30 ± 0.09^b,c
Epicatechin 4′-O-sulphate	0.71 ± 0.03^b	1.30 ± 0.14^b	0.57 ± 0.00^a
Epicatechin 3′-O-sulphate	0.40 ± 0.01^a	1.46 ± 0.04^b,c	0.43 ± 0.00^a
Epicatechin 5-O-sulphate	0.43 ± 0.00^e	1.75 ± 0.09^c,d	0.58 ± 0.06^a
Epicatechin 7-O-sulphate	0.56 ± 0.01^a,b	1.99 ± 0.01^d	0.36 ± 0.02^a
α-Tocopherol	1.01 ± 0.02^c	0.98 ± 0.03^a	1.18 ±  0.01^b
Note: ^a,b,c,d,e,f Values in the same column with different letters are significantly different: LSD (p <0.05).