Development of a peroxide biodetector for a direct detection of biofilms produced by catalase-positive bacteria on food-contact surfaces

Figures & data

Figure 1. Biofilms of: (A) L. brevis, (B) S. Typhimurium, and (C) C. sakazakii. Biofilms formed on stainless steel, without washes (A-1, B-1, and C-1), and with three washes (A-2, B-2, and C-2). Epifluorescent images obtained with LIVE/DEAD® stain. Viable cells stained in green colour and not viable cells in red. (All figures at 40× magnification).

Figura 1. Biofilms de: (A) L. brevis, (B) S. Typhimurium y (C) C. sakazakii. Las biopelículas se formaron en acero inoxidable, sin enjuagues (A-1, B-1, y C-1), y con tres enjuagues (A-2, B-2, y C-2). Las imágenes epifluorescentes se obtuvieron mediante la aplicación del colorante LIVE/DEAD®. Las células viables se tiñeron de verde y las no viables de rojo. (Todas las figuras aparecen con un aumento de 40×.)

Figure 2. Biofilms of: (A) S. aureus, E. coli (B), L. monocytogenes (C), and P. aeruginosa (D). Biofilms formed on stainless steel, without washes (A-1, B-1, C-1, and D-1), and with three washes (A-2, B-2, C-3, and D-2). Epifluorescent images obtained with LIVE/DEAD® stain. Viable cells stained in green colour and not viable cells in red. (All figures at 40× magnification).

Figura 2. Biofilms de: (A) S. aureus, E. coli (B), L. monocytogenes (C), y P. aeruginosa (D). Los biofilms se formaron en acero inoxidable, sin enjuagues (A-1, B-1, C-1, y D-1), y con tres enjuagues (A-2, B-2, C-3, y D-2). Las imágenes de epifluorescencia directa se obtuvieron mediante la aplicación del colorante LIVE/DEAD®. Las células viables se tiñeron de verde y las no viables de rojo. (Todas las figuras aparecen con un aumento de 40×.)

Figure 3. Detection of P. aeruginosa biofilms by (A) solution with hydrogen peroxide, (B-1) crystal violet, and (B-2) solution with hydrogen peroxide and crystal violet.

Figura 3. Detección de biofilms de P. aeruginosa biofilms mediante: (A) solución con peróxido de hidrógeno, (B-1) violeta cristal, y (B-2) solución con peróxido de hidrógeno y violeta cristal.

Figure 4. Reactions after the application of the solution with hydrogen peroxide, phosphonates, surfactants, and bleaching agents on stainless steel surfaces with biofilms of (A) E. coli, (B) S. aureus, (C) P. aeruginosa, (D) S. Typhimurium, (E) C. sakazakii, and (F) L. monocytogenes.

Figura 4. Reacciones después de la aplicación de la solución con peróxido de hidrógeno, fosfonatos, surfactantes, y agentes blanqueadores en las superficies de acero inoxidable con los biofilms de (A) E. coli, (B) S. aureus, (C) P. aeruginosa, (D) S. Typhimurium, (E) C. sakazakii, y (F) L. monocytogenes.

Figure 5. Biofilms on stainless steel coupons detected after the spray application of the solution with hydrogen peroxide, phosphonates, surfactants, and bleaching agents of (A) E. coli, (B) P. aeruginosa, and (C) L. brevis, placed in a flat position.

Figura 5. Biofilms en cupones de acero inoxidable detectadas después de la aplicación mediante rociado de la solución con peróxido de hidrógeno, fosfonatos, surfactantes y agentes blanqueadores de (A) E. coli, (B) P. aeruginosa, y (C) L. brevis, colocadas en posición plana.

Figure 6. Reactions after the spray application of the solution with hydrogen peroxide, phosphonates, surfactants, and bleaching agents on stainless steel surfaces for the detection of biofilms from (A) E. coli, (B) P. aeruginosa, and (C) L. brevis, formed with different inoculum volumes (25 µl, 50 µl, 100 µl, and 200 µl).

Figura 6. Reacciones después de la aplicación mediante rociado de la solución con peróxido de hidrógeno, fosfonatos, surfactantes, y agentes blanqueadores en las superficies de acero inoxidable para la detección de biofilms generados por (A) E. coli, (B) P. aeruginosa, y (C) L. brevis, formadas con distintos volúmenes de inóculo (25 µl, 50 µl, 100 µl, y 200°µl).

Table 1. Counts of microorganisms by microscopic epifluorescent assay on the biofilms formed with inoculum of 25 µl, 50 µl, 100 µl, and 200 µl. Results expressed as log₁₀ CFU cm^−2.

Tabla 1. Recuentos de microorganismos detectados en los biofilms formados con inóculos de 25 µl, 50 µl, 100 µl, y 200 µl realizados por ensayo microscópico epifluorescente. Los resultados son expresados en log₁₀ CFU cm⁻².

Volume of inoculum	E. coli	P. aeruginosa	L. brevis
25 µl	5.66	5.82	5.01
50 µl	5.96	6.21	5.67
100 µl	6.55	6.30	5.19
200 µl	6.94	6.48	5.23

Figure 7. Reaction from P. aeruginosa biofilms on polypropylene surfaces using the solution with hydrogen peroxide, phosphonates, surfactants, and bleaching agents after (A) zero, (B) 5 s, and (C) 5 min.

Figura 7. Reacción de biofilms de P. aeruginosa en superficies de polipropileno, usando la solución con peróxido de hidrógeno, fosfonatos, surfactantes, y agentes blanqueadores después de (A) 0, (B) 5 segundos, y (C) 5 minutos.

Figure 8. Reaction from P. aeruginosa biofilms on polypropylene surfaces using (A) solution with hydrogen peroxide, phosphonates, surfactants, and bleaching agents, and (B) solution with hydrogen peroxide.

Figura 8. Reacción de los biofilms de P. aeruginosa en superficies de polipropileno usando (A) solución con peróxido de hidrógeno, fosfonatos, surfactantes, y agentes blanqueadores, y (B) solución con peróxido de hidrógeno.